Multiplex PCR: a primer for the intensivist

Abstract

La polymerase chain reaction (PCR) est une technique de biologie moléculaire d’importance fondamentale qui permet de détecter et quantifier des fragments spécifiques d’acides nucléiques. En combinant plusieurs primers dans une même réaction, il est possible de détecter de manière simultanée plusieurs cibles moléculaires distinctes, ce qui défi nit la PCR multiplex (mPCR). L’application la plus fréquente en réanimation concerne le diagnostic syndromique des infections, rendu possible par des outils diagnostiques multicibles qui permettent la détection simultanée de plusieurs pathogènes et gènes de résistance aux antibiotiques dans des échantillons biologiques variés. Dans cette fiche technique, nous décrivons d’abord les aspects techniques de la PCR : PCR singleplex, quantitative, digitale, multiplex. Nous détaillons les différentes plateformes commercialisées pour le diagnostic syndromique des infections, en décrivant les panels disponibles, leurs indications, leurs performances diagnostiques et leurs limites. Finalement, nous évoquons l’utilisation de la mPCR pour l’analyse de la réponse de l’hôte, un domaine de recherche où l’objectif est de réduire l’hétérogénéité inhérente aux syndromes de réanimation (par exemple le sepsis) par la quantifi cation d’ARN messages circulants.